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学校办学渊源可追溯至清嘉庆十年(1805)在可园创办的正谊书院。光绪三十三年(1907),苏州开明士绅王同愈、蒋炳章等人以筹集公众款项形式立学,校名为苏州公立第一中学堂,因校址在玉带河畔草桥堍,师生皆称"草桥中学"。1912年改名为吴县县立第一中学校,1913年改称江苏省立第二中学校,1927年改称江苏省立苏州中学初中部,1952年始称苏州第一中学校。
1952至1953年间,私立苏州伯乐中学高中部、私立苏州乐益女子中学、私立苏州五爱中学高中部、私立苏州乐群初级中学先后并入。1970年校名恢复为苏州市第一中学校,1971年苏州市第二十中学并入。1989年学校被命名为"苏州大学第一附属中学"。1995年与苏州市三元中学联合办学,三元中学成为市一中分校。1996年被江苏省教委批准为省重点中学。2003年与苏州市第二高级中学合并办学,原"苏州市第二高级中学"建制撤销,合并后本部为纯高中。2010年初中部与草桥实验中学、虎丘实验中学合并组建苏州市草桥中学校,本校再次变更为纯高中学校。2016年4月,经江苏省、苏州市两级人民政府批准,更名为江苏省苏州第一中学校。
学校本部位于苏州市姑苏区公园路278号,前倚干将河,后枕苏州公园。占地63亩,建筑面积27500平方米。学校现为拥有本部的纯高中学校,并设有江苏省苏州第一中学国际部(苏州国际预科学校)。据2015年9月数据,本部及草桥实验中学占地面积4.3万余平方米,分校占地面积3.5万余平方米,全校在籍学生5千余人,教职工200余人。
学校拥有省特级教师10名,高级教师92余名,9名教师分别获全国省市优秀教师(教育工作者)称号,9名教师为苏州市学科带头人,20多名青年教师被评为苏州市教坛新秀,十多名教师有赴国外执教经历。
学校曾被国家教育部列入全国"百所名校"行列,被省教育厅确认基本达到国家级示范性普通高中标准,是江苏省文明单位、全国青少年体育工作先进集体。连续多年教育教学质量位居市区中学前列,高考本科达线率、大学录取率均保持高位,相当数量高中毕业生被国内名牌重点大学录取。物理、化学等学科竞赛多次获省级及以上奖项。
学校早期掌校政者有王同愈、蒋炳章、蔡俊镛、袁希洛、汪家玉等,曾担任教职的有吕叔湘、匡亚明、张闻天等学者。校友中有叶圣陶、顾颉刚、顾廷龙、吴湖帆、陆文夫等文化英杰,以及钱令希、刘建康、谈镐生、钱人元、冯康、谢敏元等多位两院院士。
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