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学校创建于1945年9月,初名私立石城中学,于南京市估衣廊城中会堂诞生,1946年1月迁至玉泉路1号。1949年由南京市人民政府接管,1956年被命名为"南京市第二十九中学",1960年更名为"江苏教育学院附属中学",1999年更名为"江苏教育学院附属高级中学"。2002年底,原南京五中初中部(致远中学)并入;2012年,原南京市第四中学与学校整合,成为一校多址的完全中学。2014年4月,经南京市人民政府同意、鼓楼区人民政府批准,恢复"南京市第二十九中学"校名。2025年秋,学校国际课程首次招生;2026年3月,锦江校区正式启用,开启"一校两址"双翼驱动的办学新阶段。
学校主校区(龙江校区)位于南京市鼓楼区蓝天园23号。锦江校区位于鼓楼区清凉门大街264号(来源中提及此地址为校区之一)。截至2014年9月,学校建有篮球场、排球场、乒乓球场及二百米塑胶跑道环绕的人造草坪田径运动场;有两座规范化教学楼、一座5千平方米现代化教学实验楼、一座办公楼和一座现代化多功能报告厅,配有6个理、化、生实验室、3间音乐教室(含1间舞蹈教室)、2间美术教室、1间电子化图书馆和1间可容纳400人的电子化食堂,已实现班班通网络与校园数字化信号系统。截至2015年11月,学校校园面积2万余平方米。
截至2015年11月,学校有700名教职工,其中全国劳模1人,江苏省有突出贡献的中青年专家1人,教授级高级教师1人,江苏省特级教师2人,江苏省"三三三"工程培养对象2人,市、区"优秀青年教师"等112人;具有博士、硕士学历(学位)的教师占专任教师总数的31%。
学校校训为"己所不欲,勿施于人"。先后获得国家级示范高中、首批江苏省四星级高中、全国文明单位、全国现代教育技术实验学校、全国绿色学校、江苏省模范学校、江苏省德育先进学校、江苏省社会科学普及示范基地、江苏省高中儒学经典课程基地等称号。学校武术、排球、跆拳道等为传统体育项目,1996年被命名为"江苏省体育后备人才试点学校",2002年被命名为"南京市中学生武术训练中心",多次在省、市及全国比赛中取得优异成绩。学校曾四次蝉联"江苏省文明单位"称号,2006—2007年连续两次获得南京市高考绩效评估最高奖项"综合奖"。
2014年至2016年,在各类科技竞赛中,学校共有460人次获省级以上大奖,其中近30人次获全国、省级一等奖,2名学生获全国青少年科技创新奖;在全国高中数学、物理、生物、信息学科奥林匹克竞赛中,有10余人获全国一等奖,近60名学生获省级一等奖。2015年全国信息学奥林匹克竞赛,2位同学获国家二等奖和江苏省一等奖。知名校友包括王怀民、刘江川、惠若琪等。
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